就在德川军击溃朝仓军的同时，织田军方面也终于迎来了期盼已久的援军。围攻横山城的丹羽长秀，接到织田信长的紧急命令后，立刻下令撤围，率领着所部兵力，以及美浓三人众稻叶一铁、氏家卜全、安藤守就的部队，火速赶往姊川战场。
丹羽长秀的援军抵达后，织田军的兵力瞬间得到了极大补充，压力也大大缓解。
更重要的是，朝仓军的溃败，使得浅井军的侧翼彻底暴露。原本，浅井军与朝仓军相互配合，形成了对织田-德川联军的对峙之势。如今，朝仓军撤退，浅井军瞬间陷入了东、西、南三方面的夹击之中。
战局，在这一刻发生了惊天逆转！
织田信长看到援军抵达，又得知德川军击溃朝仓军的消息，心中大喜。他立刻下令，全军总攻，向着浅井军的阵地发起了猛烈冲击。丹羽长秀与美浓三人众率领援军，从东侧向着浅井军侧翼发起进攻；德川军在击溃朝仓军后，也分出部分兵力，从西侧向着浅井军后方发起进攻；织田军的剩余部队，则从正面向着浅井军发起进攻。
浅井军原本还沉浸在接连攻破织田军十一阵的喜悦之中，眼下却突然发现自己陷入了三面包围，顿时陷入了巨大恐慌。矶野员昌虽然勇猛，却也无法同时抵挡三方面的进攻。浅井军的防线在织田-德川联军的猛烈进攻下，瞬间崩溃。士卒纷纷溃败，再也无心作战。
浅井长政坐镇本阵，看到战局彻底逆转，心中充满绝望。他知道，败局已定，继续抵抗下去只会损失更多兵力，无奈之下只得下令：“全军撤退！返回小谷城！”命令下达后，浅井军如潮水般向着小谷城逃窜。
织田-德川联军则趁势展开了猛烈的掩杀，姊川合战浅井军遭遇惨败。武士战死千余，普通士卒的伤亡更是不计其数。浅井长政所倚重的两位老家老远藤直经和浅井政澄，在战斗中奋力抵抗，最终力竭战死；弟弟浅井政之，以及弓削家澄、今村氏直等家臣，也都战死沙场。浅井家的实力，遭受了毁灭性打击。
而在此战中，表现最为亮眼的浅井家猛将矶野员昌，在发现浅井本队溃败后，深知大势已去。他不愿跟随浅井长政退回小谷城，于是率领着自己的残部，奋力杀出重围，向着佐和山城的方向逃去，准备在那里休整部队，再图后计。
姊川两岸的战场上，厮杀声渐渐平息，只剩下遍地的尸体与流淌的鲜血。
织田-德川联军高举武器，高声呐喊着胜利的口号。
织田信长站在战场上，望着眼前的惨状，以及远处逃向小谷城的浅井军残部，眼中闪烁着复仇的快意。金崎撤退的耻辱狼狈，在这一刻终于得以洗刷。德川家康则站在一旁，神色沉稳，看着德川军打扫战场，心中充满了对未来的期许。
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