让人意外的事情是,这个人的声音不是来自已经有点着急的杨光,也不是来自本来就起脾气不好的刘教授。
而是来自于陈浩然。
陈浩然说出这样的话,让在场众人,瞬间感觉到不可思议。
简直让人不敢相信。
为什么他会说出这样的话?
“陈家主他怎么了?”
“这件事情太重要了吧,重要到连陈家主都淡定不了,简直是……让人真的不可能很淡定啊!”
在场的十三世家的人交头接耳,纷纷说道。
显然,钟医也没有预料到这个状况,他深深的看了一眼陈浩然,语气坚定地说道。
“重点!重点就是乌骨藤!
乌骨藤——是萝蓐科植物通关藤的藤、根或叶,具有止咳平喘、散结止痛、清热解毒功效,民间主要用于消炎、祛肿等。
通过我的研究表明,其含有甾体、三萜、挥发油、多糖等化学成分,具有抗癌、平喘、降压、抑菌、免疫调节、保肝利尿等作用。
其提取物的纯化中药制剂已经商品化,主要用于消炎、平喘、抗癌,但其活性成分及药理作用机制仍有待进一步深入研究。
云南药厂的张秋厂长一定知道,在那里的红河州金平、元阳、个旧、蒙自等地均有乌骨藤分布,为充分开发利用该资源,本实验对其化学成分进行研究。
当然,这一次,我们也是经过了严格的药材、仪器和试剂的测试的。
我们所采用的药材乌骨藤,都是采自云南省个旧市贾沙乡水塘村,鉴定为萝蓐科植物通关藤的藤、根或叶。
仪器我采用的是Bruker.ARX.500核磁共振仪。
HERAcellC02细胞培养箱、MuhiskanSpectrum酶标仪。
薄层色谱硅胶GF254、柱色谱硅胶。SephadexLH-20凝胶。AB-8吸附树脂。
8ODS—A硅胶。甲醇为色谱纯。其他试剂均为分析纯。
而所用的试剂是来自上海碧云天生物技术有限公司的CCK-8。美国Sigma公司的DMSO。胎牛血清、RPMI1640、P/S、Try。96孔细胞培养板。
还有人胃癌细胞MNK-45、SGC-7901。5-氟尿嘧啶注射液。
实验方法是,首先提取与分离取干燥乌骨藤5千克,粉碎,百分之80乙醇回流提取3次(分别是4、3、3小时)。
然后,合并提取液,减压浓缩,得浸膏213克,加水溶解,石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取3次,减压回收溶剂。
得到石油醚部位15克、氯仿部位15克、乙酸乙酯部位27克、正丁醇部位42克
。氯仿部位以氯仿一甲醇梯度洗脱,得到药物标志物1—3,经反复硅胶柱层析,分别得到化合物9(10毫克)、1(14毫克)、6(24毫克)。
乙酸乙酯部位以石油醚-丙酮梯度洗脱,得到流份实验标志物1~4,其中实验标志物1步硅胶柱层析,得到化合物1(65毫克)。
实验标志物3经反复硅胶柱层析和SephadexLH-20凝胶柱纯化,得到化合物7(35毫克)和8(26毫克)。
正丁醇部位以氯仿一甲醇梯度洗脱,得到流份实验标志物1~4,其中实验标志物1经反复硅胶柱层析,得到化合物5(51毫克)。
实验标志物4上ODS柱,甲醇一水梯度洗脱,再经SephadexLH-20凝胶柱纯化,得到化合物2(42毫克)、3(57毫克)、4(73毫克)。
既然我觉得它有用,那么我们采用抗肿瘤活性实验法进行实验。
首先,细胞接种用含百分之10胎牛血清的RPMI1640培养液培养MNK-45和SGC一7901,收集对数生长期细胞,消化后调整其悬液浓度,以每孔1×104个细胞接种于96孑L板,每孔200trL。
细胞培养将细胞板放人CO:孵箱中,在37摄氏度、百分之5CO,条件下培养24小时,当细胞达到80%~90%汇合度时,弃去培养基。
接下来,就是细胞给药。
我们将将样品用DMSO溶解后,按200、100、50、25、12.5克/毫升质量浓度加人细胞孔内,重复3批,并另加3孔作为阳性对照(5-氟尿嘧啶)组。
3孔作为DMSO对照组,每孔总体积100止,在酶联免疫检测仪上测定各孑L吸光度,计算细胞抑制率、
公式为抑制率=(1一加药细胞吸光度/对照细胞吸光度)×100%。再采用Logit法计算IC。
然后是实验结果。
结构鉴定分别有化合物1:白色无定形粉末(甲醇)。
化合物2:白色粉末(氯仿),化合物3:针状结晶(甲醇)。化合物4:黄色粉末(甲醇)。化合物5:黄色针晶(甲醇)化合物6:黄色粉末(甲醇),化合物7:无色针状结晶(氯仿),化合物8:白色粉末(甲醇)。
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